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第一章 微生物育种学实验室的仪器设备及基本操作1

第一节 微生物育种学实验室注意事项1

第二节 微生物育种学实验室的主要仪器设备1

第三节 微生物育种学实验中的基本操作10

第二章 微生物的分离筛选与鉴定39

实验1土壤中四大类微生物的分离与鉴别39

实验2碱性蛋白酶产生菌的分离筛选及活性测定43

实验3脂肪酶产生菌的筛选47

实验4产淀粉酶芽孢杆菌的分离及酶活检测50

实验5抗生素产生菌的筛选及活性测定52

实验6.土壤中纤维素分解菌的分离57

实验7生物降解塑料产生菌的分离61

实验8有机卤化物降解菌的筛选63

实验9极端环境中嗜热菌的分离67

实验10自养型硝酸细菌的分离68

实验11利用亨盖特厌氧滚管技术对双歧杆菌进行活菌计数72

实验12担子菌的分离培养75

实验13噬菌体的分离、纯化及其效价的测定76

实验14抗噬菌体苏氨酸产生菌的选育80

实验15 宏基因组文库构建82

实验16细菌鉴定中常用的生理生化反应88

实验17利用16S rRNA基因序列分析进行微生物分类鉴定92

第三章 微生物的诱变育种107

实验18细菌的紫外诱变107

实验19营养缺陷型的筛选和鉴定110

实验20紫外线与硫酸二乙酯复合诱变产蛋白酶的枯草芽孢杆菌115

实验21利用氮离子注入诱变技术筛选L-精氨酸高产突变株118

实验22耐高浓度自身代谢产物卡那霉素链霉菌的高产菌株的选育120

实验23利用AEC抗性突变选育金针菇高赖氨酸含量品种122

实验24高通量选育复合诱变的谷氨酸高产菌124

实验25由转座子引起的插入突变126

实验26正交法优化培养条件127

实验27响应面法优化米曲霉α-淀粉酶发酵培养基130

实验28均匀实验设计优化发酵培养基配方136

第四章 细胞水平基因重组育种141

实验29大肠杆菌杂交及基因定位实验141

实验30大肠杆菌？噬菌体的局限性转导144

实验31酵母单倍体细胞分离与鉴定147

实验32谷氨酸棒杆菌的原生质体融合150

实验33霉菌原生质体的融合153

实验34酵母的原生质体融合156

实验35应用基因组改组技术选育谷氨酸高产菌159

第五章 分子育种163

实验36利用电子克隆技术获得基因163

实验37扩展青霉脂肪酶基因的克隆与表达172

实验38酵母乙醇脱氢酶11基因敲除176

实验39 Red系统介导的大肠杆菌的基因敲除179

实验40 PCR定点突变改造微生物菌种184

实验41基于易错PCR的分子定向进化188

第六章 菌种保藏193

实验42常用的简易菌种保藏法194

实验43冷冻真空干燥保藏法198

实验44液氮超低温保藏法200

主要参考文献203

附录1常用培养基的配制205

附录2常用试剂和溶液的配制214